O lume o lupta
─Cooperare internațională pentru a construi o comunitate globală cu un destin comun care să răspundă provocării pandemiei de COVID-19
Noul coronavirus care a răspândit întreaga lume a dus la o criză pandemică globală continuă de COVID-19.Noul coronavirus nu are granițe, nicio țară nu va fi scutită de această luptă împotriva COVID-19.Ca răspuns la această pandemie de COVID-19 la nivel mondial, Liming Bio-Products Corp aduce contribuții pentru a susține bunăstarea comunităților noastre globale.
Lumea noastră se confruntă în prezent cu impactul fără precedent al pandemiei noului coronavirus din 2019 (COVID-19).Până în prezent, nu există un medicament eficient disponibil pentru tratamentul acestei boli.Cu toate acestea, au fost dezvoltate multe teste de diagnostic pentru detectarea COVID-19.Aceste teste se bazează pe metode moleculare sau serologice pentru a detecta biomarkerii de acid nucleic sau anticorpi specifici noului coronavirus.Deoarece COVID-19 a atins un statut de pandemie, diagnosticarea precoce a infecției cu noul coronavirus este esențială pentru a evalua răspândirea virusului și pentru a-l ține, dar nu există încă un test perfect pentru utilizare universală.Trebuie să știm ce teste ar putea fi utilizate pentru screening-ul, diagnosticarea și monitorizarea infecției cu COVID-19 și care sunt limitările acestora.Este foarte important să folosiți mai bine aceste instrumente științifice și să ajutați la identificarea și controlul apariției acestei boli grave și care se răspândește rapid.
Scopul detectării noului coronavirus este de a determina dacă o persoană care are infecție cu COVID-19 sau un purtător asimptotic care poate răspândi virusul în tăcere, pentru a oferi informații esențiale pentru a ghida luarea deciziilor pentru tratamentul clinic.Studiile anterioare au arătat că 70% din deciziile clinice depind de rezultatele testării.Atunci când se folosesc metode de detectare diferite, cerințele truselor de reactivi de detecție sunt, de asemenea, diferite.
figura 1
Figura 1:Diagramă care arată etapele cheie ale nivelurilor generale ale biomarkerilor în cursul de timp tipic al infecției cu COVID-19.Axa X indică numărul de zile de infecție, iar axa Y indică încărcătura virală, concentrația de antigene și concentrația de anticorpi în diferite perioade.Anticorpul se referă la anticorpi IgM și IgG.Atât RT-PCR, cât și detectarea antigenului sunt utilizate pentru a detecta prezența sau absența noului coronavirus, ceea ce este o dovadă directă pentru detectarea precoce a pacientului.În decurs de o săptămână de la infecția virală, este de preferat detectarea PCR sau detectarea antigenului.După infecția cu noul coronavirus timp de aproximativ 7 zile, anticorpul IgM împotriva noului coronavirus a crescut treptat în sângele pacientului, dar durata existenței este scurtă, iar concentrația acestuia scade rapid.În schimb, anticorpul IgG împotriva virusului apare mai târziu, de obicei la aproximativ 14 zile după infectarea cu virusul.Concentrația de IgG crește treptat și persistă o perioadă lungă de timp în sânge.Astfel, dacă IgM este detectată în sângele pacientului, înseamnă că virusul s-a infectat recent, ceea ce este un marker precoce al infecției.Când anticorpul IgG este detectat în sângele pacientului, înseamnă că infecția virală a fost de ceva timp.Se mai numește și infecție tardivă sau infecție anterioară.Este adesea observată la pacienții care sunt în faza de recuperare.
Biomarkerii noului coronavirus
Noul coronavirus este un virus ARN, care este compus din proteine și acizi nucleici.Virusul invadează corpul gazdă (uman), pătrunde în celule prin receptorul ACE2 corespunzător site-ului de legare și se reproduce în celulele gazdă, determinând sistemul imunitar uman să răspundă la invadatorii străini și să producă anticorpi specifici.Prin urmare, acizii nucleici și antigenele fiolei și anticorpii specifici împotriva noului coronavirus pot fi, teoretic, utilizați ca biomarkeri specifici pentru detectarea noului coronavirus.Pentru detectarea acidului nucleic, tehnologia RT-PCR este cea mai utilizată, în timp ce metodele serologice sunt utilizate în mod obișnuit pentru detectarea noilor anticorpi specifici coronavirusului.În prezent, există o varietate de metode de testare disponibile pe care le putem alege pentru testarea infecției cu COVID-19 [1].
Principii de bază ale principalelor metode de testare pentru noul coronavirus
Multe teste de diagnosticare pentru COVID_19 sunt disponibile până acum, cu mai multe kituri de testare care primesc aprobare în baza unei autorizații de utilizare de urgență în fiecare zi.Deși noile evoluții ale testelor apar cu atât de multe nume și formate diferite, toate testele actuale COVID_19 se bazează, practic, pe două tehnologii majore: detectarea acidului nucleic pentru ARN viral și imunotestele serologice care detectează anticorpii specifici virali (IgM și IgG).
01. Detectarea acidului nucleic
Reacția în lanț a polimerazei de transcripție inversă (RT-PCR), amplificarea izotermă mediată de buclă (LAMP) și secvențierea de generație următoare (NGS) sunt metodele comune de acid nucleic pentru detectarea noului ARN coronavirus.RT-PCR este primul tip de test pentru COVID-19, recomandat atât de Organizația Mondială a Sănătății (OMS), cât și de Centrul SUA pentru Controlul și Prevenirea Bolilor (CDC).
02.Detecția anticorpilor serologici
Anticorpul este o proteină protectoare produsă în corpul uman ca răspuns la infecția cu virus.IgM este un tip de anticorp timpuriu, în timp ce IgG este un anticorp de tip mai târziu.Proba de ser sau plasmă este de obicei examinată pentru prezența unor tipuri specifice de IgM și IgG ale anticorpului pentru evaluarea fazelor acute și de convalescență ale infecției cu COVID-19.Aceste metode de detectare pe bază de anticorpi includ testul imunocromatografiei cu aur coloidal, imunocromatografia latex sau cu microsfere fluorescente, testul imunosorbent legat de enzime (ELISA) și testul de chemiluminiscență.
03.Detecția antigenului viral
Antigenul este o structură a virusului recunoscută de organismul uman care declanșează sistemul imunitar de apărare să producă anticorpi pentru a elimina virusul din sânge și țesuturi.Un antigen viral prezent pe virus poate fi țintit și detectat prin utilizarea imunotestelor.La fel ca ARN-ul viral, antigenele virale sunt prezente și în tractul respirator al persoanelor infectate și pot fi utilizați pentru a diagnostica faza acută a infecției cu COVID-19.Prin urmare, se recomandă adesea recoltarea de probe ale căilor respiratorii superioare, cum ar fi salivă, tampoane nazofaringiene și orofaringiene, spută de tuse profundă, lichid de lavaj bronhoalveolar (BALF) pentru testarea inițială a antigenului.
Selectarea metodelor de testare pentru noul coronavirus
Selectarea unei metode de testare implică mulți factori, inclusiv contextul clinic, controlul calității testării, timpul de realizare, costurile de testare, metodele de recoltare a probelor, cerințele tehnice ale personalului de laborator, cerințele privind instalațiile și echipamentele.Detectarea acizilor nucleici sau a antigenelor virale este de a furniza dovezi directe ale prezenței virusurilor și de a confirma diagnosticul de infecție cu noul coronavirus.Deși există multe metode pentru detectarea antigenului, sensibilitatea lor de detectare a noului coronavirus este teoretic mai mică decât cea a amplificării RT-PCR.Testarea anticorpilor este detectarea anticorpilor antivirus produși în corpul uman, care întârzie în timp și adesea nu pot fi utilizate pentru detectarea precoce în timpul fazei acute a infecției cu virus.Setarea clinică pentru aplicațiile de detectare poate varia, iar locurile de colectare a probelor pot fi, de asemenea, diferite.Pentru detectarea acizilor nucleici virali și a antigenelor, specimenul trebuie colectat în tractul respirator unde este prezent virusul, cum ar fi tampoane nazofaringiene, tampoane orofaringiene, spută sau lichid de spălare bronhoalveolar (BALF).Pentru detectarea pe bază de anticorpi, eșantionul de sânge trebuie colectat și examinat pentru prezența anticorpului antivirus specific (IgM/IgG).Cu toate acestea, rezultatele testelor de anticorpi și acid nucleic se pot completa reciproc.De exemplu, atunci când rezultatul testării este acid nucleic negativ, IgM negativ, dar IgG pozitiv, aceste rezultate indică faptul că pacientul nu este purtător de virus în prezent, dar a fost recuperat din noua infecție cu coronavirus.[2]
Avantajele și dezavantajele testelor noului coronavirus
În Protocolul de Diagnostic și Tratament pentru Noul Coronavirus Pneumonie (Versiunea de Probă 7) (Eliberat de Comisia Națională de Sănătate și Administrația de Stat a Medicinei Tradiționale Chineze la 3 martie 2020), testarea acidului nucleic este utilizată ca metodă standard de aur pentru diagnosticarea romanului. infecția cu coronavirus, în timp ce testarea anticorpilor este, de asemenea, considerată una dintre metodele de confirmare pentru diagnostic.
Constatări patogene și serologice
(1) Constatări patogene: Noul acid nucleic coronavirus poate fi detectat în tampoane nazofaringiene, spută, secreții ale tractului respirator inferior, sânge, fecale și alte specimene utilizând metodele RT-PCR și/sau NGS.Este mai precis dacă probele sunt obținute din tractul respirator inferior (extracția spută sau a tractului aerian).Probele trebuie prezentate pentru testare cât mai curând posibil după colectare.
(2) Constatări serologice: IgM specifică virusului NCP devine detectabilă la aproximativ 3-5 zile de la debut;IgG atinge o titrare de cel puțin 4 ori mai mare în timpul convalescenței comparativ cu faza acută.
Cu toate acestea, selecția metodelor de testare depinde de locațiile geografice, reglementările medicale și setările clinice.În SUA, NIH a emis Orientări de tratament pentru boala coronavirus 2019 (COVID-19) (site actualizat: 21 aprilie 2020) și FDA a emis Politica pentru teste de diagnostic pentru boala coronavirus-2019 în timpul urgenței de sănătate publică (emis la 16 martie 2020). ), în care testarea serologică a anticorpilor IgM/IgG selectată doar ca test de screening.
Metoda de detectare a acidului nucleic
RT_PCR este un test de acid nucleic extrem de sensibil conceput pentru a detecta dacă noul ARN coronavirus este prezent sau nu în specimenul respirator sau de altă natură.Un rezultat pozitiv al testului PCR înseamnă prezența noului ARN coronavirus în probă pentru a confirma infecția cu COVID-19.Un rezultat negativ al testului PCR nu înseamnă absența infecției cu virus, deoarece ar putea fi afectat de calitatea proastă a probei sau de punctul de timp al bolii în faza de recuperare etc.Deși RT-PCR este un test extrem de sensibil, are câteva dezavantaje.Testele RT-PCR pot fi laborioase și consumatoare de timp, depind în mod esențial de calitatea înaltă a probei.Aceasta poate fi o provocare, deoarece cantitatea de ARN viral nu numai că variază enorm între diferiți pacienți, dar poate varia și în cadrul aceluiași pacient, în funcție de momentele în care este colectată proba, precum și de fazele de infecție sau de debutul simptomelor clinice.Detectarea noului coronavirus necesită specimene de înaltă calitate care conțin o cantitate suficientă de ARN viral intact.
Testul RT-PCR poate da un rezultat negativ incorect (fals negativ) pentru unii pacienți care au infecție cu COVID-19.După cum știm, principalele locuri de infecție ale noului coronavirus sunt localizate la plămâni și tractul respirator inferior, cum ar fi alveolele și bronhiile.Prin urmare, specimenul de spută dintr-o tuse profundă sau lichidul de spălare bronhoalveolar (BALF) considerată a avea cea mai mare sensibilitate pentru detectarea virală.Cu toate acestea, în practica clinică, probele sunt adesea colectate din tractul respirator superior folosind tampoane nazofaringiene sau orofaringiene.Colectarea acestor specimene nu este doar inconfortabilă pentru pacienți, dar necesită și personal instruit special.Pentru a face prelevarea mai puțin invazivă sau mai ușoară, în unele cazuri, pacienților li se poate administra un tampon oral și le poate permite să preleveze o probă din mucoasa bucală sau prin tamponarea limbii.Fără suficient ARN viral, RT-qPCR poate returna un rezultat fals negativ al testului.În provincia Hubei, China, sensibilitatea RT-PCR în detectarea inițială a fost raportată doar de aproximativ 30%-50%, cu o medie de 40%.Rata ridicată a fals-negativilor a fost cel mai probabil cauzată de eșantionarea insuficientă.
În plus, testul RT-PCR necesită personal foarte instruit pentru a efectua pași complexe de extracție a ARN și procedura de amplificare PCR.De asemenea, necesită un nivel mai ridicat de protecție a biosecurității, un laborator special și un instrument PCR în timp real.În China, testul RT-PCR pentru detectarea COVID-19 trebuie efectuat în laboratoare de nivel 2 de biosecuritate (BSL-2), cu protecția personalului folosind practica de nivel 3 de biosecuritate (BSL-3).Conform acestor cerințe, de la începutul lunii ianuarie până la începutul lunii februarie 2020, capacitatea laboratorului CDC din China Wuhan a fost capabilă să detecteze doar câteva sute de cazuri pe zi.În mod normal, aceasta nu ar fi o problemă atunci când se testează alte boli infecțioase.Cu toate acestea, atunci când se confruntă cu o pandemie globală, cum ar fi COVID-19, cu potențial milioane de oameni care urmează să fie testați, RT-PCR devine o problemă critică datorită cerințelor sale pentru facilități speciale de laborator sau echipamente tehnice.Aceste dezavantaje pot limita utilizarea RT-PCR ca instrument eficient pentru screening și, de asemenea, pot duce la întârzieri în raportarea rezultatelor testării.
Metoda de detectare a anticorpilor serologici
Odată cu progresul evoluției bolii, în special în stadiile mijlocii și târzii, rata de detectare a anticorpilor este foarte mare.Un studiu din Spitalul Central de Sud din Wuhan a arătat că rata de detectare a anticorpilor ar putea ajunge la peste 90% în a treia săptămână de infecție cu COVID-19.De asemenea, anticorpul este produsul răspunsului imun uman împotriva noului coronavirus.Testul de anticorpi oferă mai multe avantaje față de RT-PCR.În primul rând, testele de anticorpi serologici sunt simple și rapide.Testele de flux lateral de anticorpi pot fi utilizate pentru punctul de îngrijire pentru a oferi un rezultat în 15 minute.În al doilea rând, ținta detectată de testul serologic este anticorpul, despre care se știe că este mult mai stabil decât ARN-ul viral.În timpul colectării, transportului, depozitării și testării, probele pentru testele de anticorpi sunt în general mai stabile decât probele pentru RT-PCR.În al treilea rând, deoarece anticorpul este distribuit uniform în circulația sângelui, există mai puține variații de eșantionare în comparație cu testul cu acid nucleic.Volumul de probă necesar pentru testul cu anticorpi este relativ mic.De exemplu, 10 microlitri de sânge prin înțepare cu degetul este suficient pentru a fi utilizat în testul de curgere laterală a anticorpilor.
În general, testul de anticorpi este ales ca un instrument suplimentar pentru detectarea acidului nucleic pentru a îmbunătăți rata de detectare a noului coronavirus în timpul cursurilor bolii.Când testul de anticorpi este utilizat împreună cu un test de acid nucleic, acesta poate crește acuratețea testului pentru diagnosticarea COVID19 prin reducerea potențialelor rezultate fals pozitive și fals negative.Ghidul de operare actual nu recomandă utilizarea a două tipuri de test separat ca format de detectare independent, dar ar trebui să fie utilizat ca format combinat.[2]
Figura 2:Interpretarea corectă a rezultatelor testelor de acid nucleic și anticorpi pentru detectarea infecției cu coronavirus nou
Figura 3:Liming Bio-Products Co., Ltd. – Kit de test rapid dublu cu anticorpi IgM/IgG noul coronavirus (StrongStep®Test rapid pentru anticorpi SARS-CoV-2 IgM/IgG, imunocromatografie latex)
Figura 4:Liming Bio-Products Co., Ltd. – StrongStep®Kit PCR Multiplex Real-Time Novel Coronavirus (SARS-CoV-2) (detecție pentru trei gene, metoda sondei fluorescente).
Notă:Acest kit PCR extrem de sensibil, gata de utilizare, este disponibil în format liofilizat (proces de liofilizare) pentru depozitare pe termen lung.Trusa poate fi transportata si depozitata la temperatura camerei si este stabila timp de un an.Fiecare tub de premix conține toți reactivii necesari pentru amplificarea PCR, inclusiv transcriptază inversă, polimerază Taq, primeri, sonde și substraturi dNTPs. Utilizatorii pot reconstitui pur și simplu amestecul adăugând apă de gradul PCR împreună cu șablonul și apoi încărcați pe un instrument PCR pentru a rula amplificarea.
Ca răspuns la noul focar de coronavirus, Liming Bio-Products Co., Ltd. a lucrat rapid pentru a dezvolta două truse de diagnosticare pentru a permite laboratoarelor clinice și de sănătate publică să diagnosticheze rapid infecția cu COVID-19.Aceste truse sunt foarte potrivite pentru a fi utilizate pentru screening-ul pe scară largă în țările și regiunile în care noul focar de coronavirus se răspândește rapid și pentru a oferi diagnostic și confirmare pentru infecția cu COVID-19.Aceste truse sunt destinate utilizării numai în conformitate cu Autorizația de utilizare în caz de urgență pre-notificată (PEUA).Testarea este limitată la laboratoarele certificate conform reglementărilor autorităților naționale sau locale.
Metoda de detectare a antigenului
1. Detectarea antigenului viral este clasificată în aceeași categorie de detecție directă ca și detectarea acidului nucleic.Aceste metode de detectare directă caută dovezi ale agenților patogeni virali în specimen și pot fi utilizate pentru confirmarea diagnosticului.Cu toate acestea, dezvoltarea truselor de detectare a antigenului necesită o calitate înaltă a anticorpilor monoclonali cu afinitate puternică și sensibilitate ridicată, capabili să recunoască și să capteze virusuri patogeni.De obicei, durează mai mult de șase luni pentru a selecta și optimiza un anticorp monoclonal adecvat pentru utilizare la pregătirea trusei de detectare a antigenului.
2. În prezent, reactivii pentru detectarea directă a noului coronavirus sunt încă în stadiu de cercetare și dezvoltare.Prin urmare, niciun kit de detectare a antigenului nu a fost validat clinic și disponibil comercial.Deși s-a raportat anterior că o firmă de diagnosticare din Shenzhen a dezvoltat un kit de detectare a antigenului și a fost testat clinic în Spania, fiabilitatea și acuratețea testului nu au putut fi validate din cauza prezenței problemelor de calitate a reactivului.Până în prezent, NMPA (fostul FDA din China) nu a aprobat încă niciun kit de detectare a antigenului pentru uz clinic.În concluzie, au fost dezvoltate o varietate de metode de detectare.Fiecare metodă are avantajele și limitările sale.Rezultatele din diferite metode pot fi utilizate pentru verificare și completare.
3. Producerea unui kit de testare COVID-19 de calitate depinde în mare măsură de optimizarea în timpul cercetării și dezvoltării.Liming Bio-Product Co.,Ltd.kiturile de testare trebuie să îndeplinească standarde stricte de producție și control al calității pentru a se asigura că oferă cele mai înalte niveluri de performanță și coerență.Oamenii de știință de la Liming Bio-Product Co., Ltd. au peste douăzeci de ani de experiență în proiectarea, testarea și optimizarea truselor de diagnostic in vitro pentru a asigura cel mai înalt nivel de performanță în cuantificarea analitică.
În timpul pandemiei de COVID-19, guvernul chinez s-a confruntat cu o creștere a cererii uriașe de materiale de prevenire a epidemiei în hotspot-urile internaționale.Pe 5 aprilie, la conferința de presă a Mecanismului Comun de Prevenire și Control al Consiliului de Stat „Consolidarea managementului calității materialelor medicale și reglementarea ordinii pieței”, Jiang Fan, un inspector de prim nivel al Departamentului de Comerț Exterior al Ministerului of Commerce, a spus: „În continuare, ne vom concentra eforturile pe două aspecte, în primul rând, pentru a accelera sprijinul pentru mai multe consumabile medicale necesare comunității internaționale și, de asemenea, pentru a îmbunătăți controlul calității, reglementarea și gestionarea produselor. Vom aduce contribuția Chinei la răspunsul în comun la epidemia globală și la construirea unei comunități cu un viitor comun pentru omenire.
Figura 5:Noul reactiv pentru coronavirus de la Liming Bio-Products Co.,Ltd. a obținut certificatul de înregistrare UE CE
Certificatul onorific
Houshenshan
Figura 6. Liming Bio-Products Co., Ltd. a sprijinit Spitalul de Munte Wuhan Vulcan(HouShenShan) pentru a lupta împotriva epidemiei de COVID-19 și a primit certificatul onorific al Crucii Roșii din Wuhan.Spitalul de munte Wuhan Vulcan este cel mai faimos spital din China care este specializat în tratamentul pacienților cu COVID-19 sever.
Pe măsură ce noul focar de coronavirus continuă să se răspândească în întreaga lume, Nanjing Liming Bio-Products Co., Ltd. face un pas pentru a sprijini și ajuta comunitățile din întreaga lume cu tehnologiile noastre inovatoare pentru a lupta împotriva acestei amenințări globale fără precedent.Testarea rapidă a infecției cu COVID-19 este o parte critică în abordarea acestei amenințări.Continuăm să contribuim într-un mod semnificativ, oferind platforme de diagnosticare de înaltă calitate în mâinile lucrătorilor din domeniul sănătății, astfel încât oamenii să poată primi rezultatele testelor critice de care au nevoie.Eforturile Liming Bio-products Co., Ltd. în lupta împotriva pandemiei de COVID-19 sunt de a contribui cu tehnologiile, experiențele și expertiza noastră comunităților internaționale pentru construirea unei comunități globale a destinului.
Apăsați lung~Scanați și urmăriți-ne
E-mail: sales@limingbio.com
Site: https://limingbio.com
Ora postării: mai-01-2020
